Medir os halos de inibição com um medidor em mm, incluindo o diâmetro dos discos. Colocar a placa de Petri a alguns centímetros de uma superfície escura, iluminando indiretamente, exceto para Linezolida, Oxacilina, e Vancomicina que devem ser lida com luz direta.
O teste de disco-difusão em ágar foi descrito em 1966 por Bauer e Kirby. É um dos métodos de sensibilidade mais simples e confiáveis. É realizado dispensando os discos de antimicrobianos sobre a placa de ágar após a aplicação do inóculo bacteriano com aproximadamente 1 a 2 x 10 UFC/mL.
Método qualitativo usado para avaliar a atividade antimicrobiana. Recomendado para produtos com baixa atividade de água (sólidos, óleos e pós) ou para avaliações preliminares de produtos em creme ou gel. Determina a existência de atividade antimicrobiana sobre micro-organismos teste relevantes.
Muitos métodos têm sido empregados para esta finalidade: E-Test, Sistema Vitek (Bio-Meriuex), Diluição seriada (MIC - Minimal Inhibitory Concentration e MBC - Minimal Bactericidal Concentration) e o método dos discos de papel de filtro. Este último método é também denominado Método de Kirby Bauer.
O antibiograma reflete apenas duas variáveis: a droga e a bactéria, sem levar em consideração os aspectos clínicos que acompanham o processo infeccioso, como a biodisponibilidade do fármaco no sítio da infecção.
O princípio deste método baseia-se na difusão, através do ágar, de um antimicrobiano impregnado em um disco de papel-filtro. A difusão do antimicrobiano leva à formação de um halo de inibição do crescimento bacteriano, cujo diâmetro é inversamente proporcional à concentração inibitória mínima (MIC) (1, 12).
Atualmente nos laboratórios o antibiograma é realizado por um equipamento em que são feitos testes de resistência e sensibilidade. O laudo liberado pelo equipamento informa quais os antibióticos que o agente infeccioso foi resistente e quais foram eficazes no combate do microrganismo e em qual concentração.
O método informa se a bactéria é resistente, sensível ou se possui sensibilidade intermediária à determinado antibiótico pela medição do halo de inibição Métodos de sensibilidade: Difusão Técnica Teste indireto: realizado com cultura pura de 24 horas de crescimento de bactérias devendo ser feito Gram antes do antibiograma.
No caso de antibiograma para Proteus sp., ignorar o véu formado na zona de inibição e ler normalmente seu diâmetro. Para limites dos halos de inibição consultar Tabela CLSI M2-A9 ou Tabela de Interpretação do Antibiograma - Cefar. As definições das classificações são:
Técnica Após 15 minutos da colocação dos discos, as placas são invertidas e incubadas Incubar de 18 a 24 horas à 35 +/- 1º C Medir o diâmetro dos halos. Classificá-los quanto a resistência, sensibilidade intermediária e sensibilidade.
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