Os cortes de tecido podem então ser corados com hematoxilina. Por sua natureza básica, a hematoxilina vai corar os ácidos nucleicos dos núcleos. Em seguida, os cortes são lavados em e corados pela eosina, um corante de natureza ácida e que irá corar os componentes básicos predominantes no citoplasma das células.
A coloração visa contrastar as estruturas teciduais. A ação da maioria dos corantes se baseia na interação entre os radicais ácidos ou básicos dos elementos químicos dos mesmos com os dos tecidos.
Uma dessas etapas é a coloração, ou seja, esses tecidos e microrganismos são corados para que consigamos vê-los na microscopia óptica. As colorações nem sempre são as mesmas, pois temos colorações que facilitam a observação de determinado tecido ou determinado microrganismo.
Nas células coradas com HE, os ácidos nucléicos presentes no núcleo são corados pela hematoxilina, corante básico, dando ao núcleo um tom azul-arroxeado. A eosina, por sua vez, um corante ácido, é atraída pelos elementos básicos das proteínas do citoplasma da célula, corando-os de róseo a vermelho.
A combinação bicrômica considerada coloração universal em histologia e histopatologia é a hematoxilina e eosina (HE) (AARESTRUP, 2012; SOUZA JUNIOR, 2010).
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Tipos de corantes
Uma das técnicas mais utilizadas é a que reúne dois corantes chamados hematoxilina e eosina e a coloração é denominada abreviadamente HE ou H&E. Os cortes são habitualmente corados inicialmente com hematoxilina e em seguida com eosina.
A rotina de feitura de lâminas no laboratório de histologia inclui as seguintes etapas: Fixação do material. Coloração e montagem do corte histológico. Inclusão. Desidratação e diafinização. Microtomia.
Usando solução de GIEMSA, diluir na proporção de 2 gotas da solução de GIEMSA para cada ml de solução tampão (ou água destilada), Cubra o esfregaço ou introduza a lâmina em recipiente com a solução de GIEMSA diluída, deixar cora por 30 minutos. Lavar a lâmina em água corrente para retirar o excesso de corante.
A coloração de Gram é um passo muito importante na caracterização e classificação inicial das bactérias.
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A coloração envolve 3 etapas principais:Coloração com violeta de cristal (um corante solúvel em água, roxo);A descoloração (utilizando etanol / acetona);A contra-coloração (utilizando corante Safranina, vermelho).
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