A microscopia de fluorescência permite até mesmo que os usuários determinem a distribuição de uma única espécie de molécula, sua quantidade e localização dentro de uma célula. ... Com a ajuda da microscopia de fluorescência de super-resolução, é possível até mesmo capturar imagens de estruturas de sub-resolução.
Como apenas células viáveis (incluindo endósporos, formas vege- tativas, bactérias anaeróbias e fungos) são capazes de reter e acumular o CFSE, serão estas as células que serão identificadas pela emissão de fluorescência.
Aplicações. A microscopia confocal permite a obtenção de imagens de alta resolução através de cortes ópticos, posteriormente agrupados para se fazer a reconstrução tridimensional da topografia de objetos complexos. ... A microscopia confocal pode ser empregada para: Observação do estado fisiológico das células e tecidos.
Na rotina da microscopia usamos as colorações de h&e (hematoxilina e eosina) ou Papanicolau para visualizarmos, com o uso de microscópio óptico, padrões de tecidos, estruturas do organismo ou células. Podemos, com isto, definir processos patológicos (inflamatórios; neoplásicos, etc.)
A evolução tecnológica ligada ao microscópio de fluorescência assume carácter multidisciplinar uma vez que se cruza com a física, a óptica, a química, a engenharia genética, a biologia.
A microscopia de fluorescência é uma das técnicas de imagem mais utilizada para o estudo da dinâmica de células vivas, devido à sua capacidade de isolar diferentes proteínas com um alto grau de especificidade, sendo a sua sensibilidade suficientemente elevada para detectar cerca de 50 moléculas/µm3.
A explicação teórica da fluorescência pressupõe que o fóton, quantum de energia eletromagnética (luz), ao ser absorvido pela molécula de uma substância, excita seus elétrons, fazendo-os saltar para níveis energéticos superiores. A molécula assim ativada transforma o excesso de energia em movimento, chocando-se com as moléculas vizinhas.
Por exemplo, a fluorescência ocorre facilmente para os átomos em fase gasosa a baixa pressão. Não havendo níveis de energia de rotação e vibração num sistema atómico, os mecanismos não-radiativos são altamente improváveis, especialmente a baixa pressão.
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