Isolar o gene de interesse Para que se tenha o DNA recombinante, de duas origens diferentes, é necessário utilizar as enzimas de restrição. Essas enzimas reconhecem a sequência alvo específica e cortam seletivamente o fragmento que será utilizado.
Enzimas de restrição são enzimas que cortam o DNA. Cada enzima reconhece um ou mais sequências alvo e corta o DNA nestas sequências ou perto delas. Muitas enzimas de restrição fazem cortes escalonados, produzindo terminações com DNA fita simples.
O gene de interesse, agora isolado, é colocado em um meio com um fragmento de DNA bacteriano circular, o plasmídio e as enzimas de restrição. O plasmídio bacteriano possui sua capacidade de inserir um fragmento de DNA externo ao seu próprio genoma.
PCR; Bibliotecas genômicas; Vetores; Sequenciamento de DNA; Hibridização; Eletroforese. FERRAMENTAS UTILIZADAS NA TECNOLOGIA DO DNA RECOMBINANTE.
· Reconhecer o que é um clone. · Reconhecer a clonagem como um avanço da ciência e pesquisa científica. · Identificar a importância dos clones para a sobrevivência de algumas espécies de vegetais. · Desenvolver pesquisas em internet e livros sobre o assunto de forma a facilitar a compreensão do assunto.
Num experimento típico de clonagem, um gene alvo é inserido num pedaço circular de DNA chamado do plasmídeo. O plasmídeo é introduzido em bactérias através de um processo chamado transformação, e bactérias portadoras do plasmídeo são selecionadas utilizando-se antibióticos.
A palavra clone, para identificar indivíduos idênticos geneticamente foi introduzida na língua inglesa no início do século XX. A sua origem etimológica é da palavra grega klon, que quer dizer broto de um vegetal. A clonagem é uma forma de reprodução assexuada que existe naturalmente em organismos unicelulares e em plantas.
Essa tecnologia permite pegar um “pedaço” do DNA e combiná-lo com outro, produzindo muitas cópias de diferentes combinações genéticas. Quando usamos a palavra clonagem é muito comum realizar a associação com o clone de um organismo inteiro, como o caso da ovelha Dolly.
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