Em genética, iniciadores ou primers são segmentos de ácidos nucléicos, com 1 a 60 ribonucleotídeos necessários à iniciação da replicação do DNA.
Primers são sequencias iniciadoras replicação do DNA que possuem entre 18 e 30 pares de base. Eles são necessários, pois a DNA polimerase precisa de uma extremidade 3 OH livre para iniciar a duplicação da fita.
Dois primers são usados para cada reação de PCR, e eles são projetados de modo que englobem a região de interesse (região que deve ser copiada). Isto é, são dadas sequências que os farão se ligar a fitas opostas do DNA molde, bem nas extremidades da região a ser copiada.
Durante a replicação do DNA em células, os primers são produzidos pela ação da RNA-polimerase especial (primase), que usualmente sintetiza RNA de transcrição 5 - 3 .
Os primers é que determinam a sequência de ácido nucleico a ser amplificada, por isso é necessário na reação a utilização de 1 par de primer: o primer sense (PS) que se liga a fita antisense (3 - 5) e o primer antisense (PAS) que se liga a fita sense (5 -3 ).
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O procedimento de PCR envolve três etapas, cada uma repetida muitas vezes.1 – Desnaturação. O DNA genômico contendo a sequência a ser amplificada é desnaturado por aquecimento a cerca de 95°C por cerca de 30 segundos. ... 2 – Anelamento ou hibridização. ... 3 – Extensão ou polimerização.
O primer inicia a síntese de DNA, isto é, faz com que ela comece. Uma vez que o primer de RNA está em seu lugar, a DNA polimerase o "amplia", adicionando nucleotídeos um por um para fazer uma nova fita de DNA que é complementar à fita molde.
Ou seja, os iniciadores são sintetizados quimicamente de modo a possuir uma sequência nucleotídica específica, previamente determinada de acordo com o trecho de DNA que se deseje amplificar. Geralmente têm comprimento entre 15 e 30 nucleotídeos.
A primase é a enzima que sintetiza os primers (iniciadores), que são pequenas sequências de RNA, a partir de um molde de DNA. Em eucariotos, a atividade da primase está localizada como componente da DNA-polimerase. A DNA-polimerase é a enzima que faz a síntese de uma nova fita de DNA.
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