O Ágar MacConkey é considerado um dos primeiros meios de cultivo para bactérias gram negativas indicando a fermentação por lactose. Recomenda-se a utilização do Ágar MacConkey em amostras clínicas que contenham microbiota mista, como urina, fezes, feridas e secreções.
Finalidade: O ágar MacConkey é um meio diferencial seletivo utilizado para o isolamento e diferenciação de enterobactérias e uma variedade de outros bastonetes gram-negativos provenientes de amostras clínicas.
O Ágar macconkey é um meio de cultivo para bactérias gram negativas e indica a fermentação por lactose , esse processo ocorre pois ele tem em seu composto substâncias que inibem o crescimento das bactérias gram positivas : violeta cristal e ácido biliar.
Os meios de cultura são insumos preparados em laboratórios que fornecem os nutrientes para o crescimento e desenvolvimento de microrganismos (como bactérias e fungos) fora do seu habitat natural.
O meio seletivo permite o crescimento de certos tipos de microrganismos e inibe o crescimento de outros microrganismos. Ele contém inibidores, geralmente antibióticos, que tornam inviável o crescimento de certos microrganismos, sem inibir o crescimento do microrganismo alvo.
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Meio Seletivo: são exemplos o Ágar Manitol Salgado e Agar SS, utilizados para selecionar as espécies que serão isoladas e impedir o crescimento de germes. Meio Diferencial: promove uma mudança na coloração das colônias de bactérias, possibilitando a distinção de vários gêneros e espécies de microrganismos.
O meio de cultura possibilita que micro-organismos cresçam e se multipliquem, ao promover um ambiente adequado e ideal para a sua proliferação. Para isso, utilizam diversos nutrientes específicos para cada micro-organismo que se deseja cultivar. São muito importantes em algumas aplicações e podem ter diversos tipos.
Os meios de cultura quimicamente definidos são uma grande classe de classificação dos meios de cultura que se baseiam na aplicação de quantidades precisas dos compostos necessários para a cultura de determinado microrganismo, portanto suas características qualitativas e quantitativas são conhecidas.
Os principais componentes de um meio de cultura são fontes de carbono, energia (açúcares), nitrogênio, fósforo e sais minerais.
Os meios de cultura são classificados de acordo com seu estado físico, podendo ser sólido, quando possui agentes solidificantes como o ágar; semissólido, quando a consistência de ágar e/ou gelatina é intermediária, ou líquido, quando não possui solidificantes, caracterizando-se como caldo.
Diferente dos outros meios de cultura, o Ágar MacConkey é seletivo, pois apresenta combinação de sais biliares e o cristal violeta, que inibem os microrganismos gram positivos, assim reduzindo relativamente doenças causadas por bactérias ou protozoários presentes nas fezes.
As bactérias fermentadoras de lactose(999 Klebsiela, Enterobacter), utilizam a lactose disponível no meio e produzem ácido como produto final.
O meio Ágar-Manitol salgado é um meio de cultura seletivo e diferencial empregado para o cultivo de bactérias Gram-positivas. Ele é seletivo porque contém 7,5% de NaCl (alta concentração de sal) que impede o crescimento de muitas bactérias.
O BD Mannitol Salt Agar é utilizado para o isolamento selectivo de estafilococos e para a detecção de Staphylococcus aureus provenientes de amostras clínicas.
Meio de Ágar Chocolate é amplamente utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresçam neste meio quase todos os tipos de microrganismos.
Há várias opções de meios para urocultura. Classicamente, os meios recomendados são o Ágar Sangue e um meio seletivo para bacilos Gram- negativos. Embora possa ser usado o Ágar Eosina Azul de Metileno ou mais comumente o Ágar MacConkey.
Um meio de cultura pode ser sintético, com componentes definidos quimicamente, ou complexo, quando são adicionadas substâncias provenientes da natureza (extrato de carne, peptona, sangue, entre outras). Quanto ao estado físico, pode ser líquido (caldo) ou sólido (caldo com 1,5% a 2% de ágar).
O principal agente gelificante utilizado em meios de cultura sólidos é o ágar. Os meios de cultura são produtos preparados em laboratórios que fornecem os nutrientes para o crescimento e desenvolvimento de micro-organismos (como bactérias e fungos) fora do seu habitat natural.
Principais meios de cultura utilizados e suas aplicaçõesAgar Nutriente.Agar CLED – Cystine Lactose Electrolyte Deficient.Agar Mueller Hinton.
O meio TSA (Tryptic Soy Agar) é um meio não selectivo onde crescem diversos tipos de bactérias heterotróficas .Preparar 500 ml de meio de cultura com a seguinte composição: ... Colocar o meio de cultura num frasco Schott de 500 ml e esterilizar na autoclave, a 121°C (1 atm), durante 15 minutos;
O BD CLED Agar (Agar de cistina lactose deficiente em electrólitos) é um meio de cultura para diferenciação para utilizar no isolamento e enumeração de bactérias da urina.
A obtenção de uma cultura pura a partir de uma cultura mista denomina-se isolamento, conseguido através da semeadura dos microrganismos na superfície de meios de cultura sólidos em placas de Petri, o que permitirá a formação de colônias (que são populações isoladas que crescem na superfície destes meios).
Meio Diferencial: possibilita a distinção entre vários gêneros e espécies de microrganismos, por possuir substâncias que permitem uma diferenciação presuntiva, evidenciada na mudança de coloração ou na morfologia das colônias.
Semeadura em placa Spread-Plate (espalhamento): consiste em espalhar o material (suspensão de células) com o auxílio de uma alça de Drigalski (para obtenção de colônias isoladas após diluição), fazendo a semeadura por toda a superfície da placa de Petri.
A coloração de Gram é um passo muito importante na caracterização e classificação inicial das bactérias.
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A coloração envolve 3 etapas principais:Coloração com violeta de cristal (um corante solúvel em água, roxo);A descoloração (utilizando etanol / acetona);A contra-coloração (utilizando corante Safranina, vermelho).
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