Ouça em voz altaPausarA espectrofotometria é um método utilizado para medir o quanto uma substância química absorve a luz, medindo a intensidade quando um feixe de luz passa através da solução da amostra. O princípio básico é que cada composto absorve ou transmite luz em uma certa amplitude de comprimento de onda.
Ouça em voz altaPausarA luz atravessa uma solução colorida presente em uma cubeta; parte é absorvida (esta absorção depende da intensidade de cor da solução). A luz transmitida (detectada por uma fotocélula) tem intensidade menor que a luz incidente.
Ouça em voz altaPausarEsta técnica se baseia na medida da absorção de radiação eletromagnética nas regiões visível e ultravioleta por espécies químicas (moléculas ou íons) em solução. Na análise quantitativa, a atenuação do feixe de radiação é, dentro de certos limites, proporcional à concentração da espécie química a ser determinada.
Ouça em voz altaPausarAs letras representam: (a) fonte de luz, (b) colimador, (c) prisma ou rede de difração, (d) fenda seletora de X, (e) compartimento de amostras com cubeta contendo solução, (f) célula fotelétrica, (g) amplificador.
Ouça em voz altaPausarPara converter um valor de porcentagem de transmitância (% T) em absorbância, use a seguinte equação: Absorbância = 2 - log (% T). Por exemplo, para converter 56% de T em absorbância, calcule 2 - log (56) = 0,252 unidades de absorbância.
Ouça em voz altaPausarPara uma radiação monocromática, a absorvância é diretamente proporcional ao caminho ótico e a concentração das espécies absorventes. A absortividade molar ou coeficiente de extinção é característica de uma substância em um dado meio para um dado λ. Indica a quantidade de luz absorvida em um dado λ.
Ouça em voz altaPausarA lei de Lambert–Beer (também designada por lei de Lambert–Beer–Bouguer) estabelece uma relação entre a absorvância (também chamada absorbância ou absorvência) de uma solução e a sua concentração, quando atravessada por uma radiação luminosa monocromática colimada (raios luminosos paralelos).
Ouça em voz altaPausarA absorção da região visível e ultravioleta depende, em primeiro lugar, do número e do arranjo dos elétrons nas moléculas ou íons absorventes. Como conseqüência, o pico de absorção pode ser correlacionado com o tipo de ligação que existe na espécie que está sendo estudada.
Ao princípio da espectrofotometria (medida de absorção ou transmissão de luz) é uma das técnicas analíticas amplamente utilizadas em laboratórios de universidades, análises clínicas, indústrias etc..
“A absorbância é diretamente proporcional a concentração da solução de amostra.” l é o comprimento da cubeta. Os componentes principais de um espectrofotômetro são apresentados e suas respectivas funções: Fonte de Luz: é composta por uma lâmpada de deutério e uma lâmpada de tungstênio (semelhante à lâmpada de carro).
Para as análises espectrofotométricas, a faixa do espectro de radiação mais utilizada vai do ultravioleta (λ = 200 nm) até o infravermelho (λ = 1000 nm). A faixa do visível vai de 4 nm, onde os seres humanos experimentam uma gama de sensações visuais denominada cores.
Espectrofotômetros de duplo feixe: dois feixes de radiação são formados no espaço. Um feixe passa pela solução de referência (branco) até o transdutor e o segundo feixe, ao mesmo tempo, passa através da amostra até o segundo transdutor.
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