O Bacteriófago lamba é modificado por engenharia genética para permitir que sítios de restrição da enzima BamHI sejam inseridos nas extremidades flanqueadoras da região I/E. O DNA de interesse também é digerido com a mesma enzima e fragmentos resultantes de peso molecular de 20 kb são selecionados para a clonagem.
Logo depois da bactéria ter sido infectada pelo vírus, ele introduz nela o seu material genético, em seguida formam-se dezenas de fagos que rompem a parede bacteriana. Esses novos fagos são capazes de infectar imediatamente outras bactérias, reiniciando o ciclo.
Um vector de clonagem deve apresentar uma sequência que permite a sua replicação no interior de uma célula hospedeira bacteriana (leveduras, no caso dos YAC's). Deve apresentar um local de clonagem, isto é, um local para inserir o DNA alvo.
Um profago é um bacteriófago (muitas vezes abreviado para "fago") cujo genoma foi inserido integrado em um cromossomo circular bacteriano ou existe como um plasmídeo extracromossomal. Esta é uma forma latente de fago, em que os genes virais estão presentes em bactérias sem causar seu rompimento.
Etapas da clonagem do DNA Cortar e abrir o plasmídeo e "inserir" o gene. Esse processo baseia-se em enzimas de restrição (que cortam o DNA) e na DNA ligase (que une/cola o DNA). Inserir o plasmídeo na bactéria. ... Cultivar lotes de bactérias portadoras de plasmídeo e usá-las como "fábricas" para fazer a proteína.
Os bacteriófagos são vírus que infectam bactérias para reproduzir-se. Como eles infectam apenas bactérias, podem ser utilizados no tratamento de bacterioses. Bacteriófagos, também chamados de fagos, são vírus que apresentam a capacidade de infectar bactérias, as quais são utilizadas para o processo de replicação viral.
Os bacteriófagos, por exemplo, agem no controle das bactérias. Também conhecidos como “fagos”, esses vírus agem como “hóspedes indesejados”. Chegam sem avisar e mudam a ordem das coisas. Já as bactérias atuam como boas anfitriãs, são altamente receptíveis e deixam o vírus se instalar.
Os vectores de clonagem são materiais biológicos essenciais para levar a cabo uma estratégia experimental de clonagem de DNA. A grande parte dos vectores usados para a clonagem de genes ou de outros fragmentos de DNA, são os plasmídeos que ocorrem naturalmente em muitas espécies bacterianas.
Em clonagem molecular, um vector é uma molécula de ADN usada como veículo para transportar artificialmente material genético estranho para outra célula, onde pode ser replicado ou expresso (por exemplo, um plasmídeo, cosmídeo, fago lambda). Um vector que contenha um ADN estranho denomina-se ADN recombinante.
Clones são um conjunto de células ou um organismo cujo conjunto de genes é idêntico ao de outro organismo. Na natureza, a clonagem ocorre em processos como a reprodução assexuada, tanto de animais quanto de vegetais, bem como na formação de gêmeos idênticos (univitelinos).
Veja também: Transplante de medula óssea – procedimento realizado para tratamento de algumas doenças A clonagem é um procedimento de grande importância, pois abre perspectivas, por exemplo, para tratamentos que necessitam de transplantes, por meio do cultivo de células idênticas às do tecido da qual foram retiradas.
Para a formação de uma biblioteca genômica, a clonagem de fragmentos maiores facilita para que a mesma seja mais representativa, contendo todo ou a maior parte do conteúdo cromossômico. Com essa finalidade, foram desenvolvidos veículos de clonagem como os bacteriófagos ou fagos lambda.
A primeira clonagem aconteceu em 1996, no Instituto Roslin, na Escócia, por um grupo de embriologistas liderado pelo doutor Ian Wilmut. Eles criaram o primeiro mamífero por meio da técnica chamada de “Clonagem Reprodutiva”, uma ovelha que ficou conhecida como “Dolly”, produzida através de uma célula somática de glândula mamária de um animal adulto.
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